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安捷倫液相色譜儀的日常保養(yǎng)方法

  • 更新日期:2020-05-26      瀏覽次數(shù):2649
    •   一、要求
        安捷倫液相色譜儀是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下特點:
        1 純度:流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細的膜過濾)。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累,會影響色譜柱的使用壽命。
        2 溶解度:樣品的溶解度要適宜如果溶解度,如果溶解度欠佳樣品會在柱頭沉淀,不但影響純化分離,還會縮短柱子的使用壽命。
        3 粘度要低:高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時間延長,選擇沸點在100℃以下的流動相。
        4 樣品易于回收,應選用揮發(fā)性溶劑。
        二、安捷倫液相色譜儀的使用與維護
        在日常分離分析工作中,色譜柱的正確使用和維護十分重要,色譜柱使用是否得當,直接影響色譜柱的壽命,在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護色譜柱。
        1 柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。
        2 如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根柱,這樣有助于延長柱子的壽命。
        3 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動,溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
        4 應逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/div>
        5 如使用柱溫控制裝置時,應注意在通人流動相后才能升溫。
        6 一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),否則反沖會迅速降低柱效。
        7 選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞,有時可以在進樣器前面連接一個預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
        8 避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱,保護柱一般是填有相似固定相的短柱。
     
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